Bradford 法*是测定总蛋白浓度*常用的方法,其结果简单快捷。Bradford 试剂含有考马斯亮蓝 (CBB-G250),这是一种三苯甲烷染料,可与蛋白质的碱性氨基酸(Arg、Lys、His)和 N 端氨基酸发生静电相互作用,或与芳香族氨基酸发生疏水相互作用。当 CBB-G250 与蛋白质非共价结合时,反应溶液的颜色(*大吸收波长)会从 465 nm(棕色)变为 595 nm(蓝色)(参见图表)。通过测量 595 nm 波长(即蛋白质与 CBB-G250 结合的状态)下的吸光度,并根据使用标准蛋白质创建的校准曲线计算样品的蛋白质浓度。虽然 Bradford 法是一种简单的方法,但吸光度可能会受到蛋白质类型和其他共存化合物的影响。特别是,已知表面活性剂会抑制CBB-G250与蛋白质的结合,从而阻碍定量分析,因为CBB-G250会被掺入胶束中。WSE -7510 EzBradford 蛋白质测定试剂盒是一款采用Bradford法定量总蛋白质的试剂盒,可*大程度地减少表面活性剂的影响。该试剂盒包含Bradford溶液、标准蛋白(BSA、BGG)以及用于减少表面活性剂干扰的蛋白质稀释液。标准方法的定量范围约为10至2,000 μg/mL,低浓度方法的定量范围约为1至50 μg/mL。